Što je antibiogram?

Antibiogramski test može se koristiti u dvije različite svrhe. Kirby-Bauerova metoda se koristi za ispitivanje osjetljivosti bakterijskog soja na različite antibiotike. Antibiogrami također mogu odrediti minimalnu inhibitornu koncentraciju (MIC) ili najmanju koncentraciju antibiotika koja će inhibirati rast bakterijskog soja, koristeći metodu razrjeđenja.

Kirby-Bauerova metoda je antibiogram koji se koristi za određivanje najboljeg antibiotika za korištenje protiv određenog bakterijskog soja. Testovi se izvode u petrijevim zdjelicama, koje su plitke, okrugle, prekrivene posude napunjene agarnim medijem ili supstancom nalik gelu natopljenom hranjivim tvarima za poticanje rasta bakterija. Bakterijski soj koji se ispituje ravnomjerno je raspoređen po površini ploče. Nekoliko kružnih papirnatih diskova, od kojih je svaki natopljen drugačijim antibiotikom, ravnomjerno je raspoređeno po površini ploče i nježno gurnuto u agar kako bi se uspostavio kontakt s bakterijama. Ploče se zatim ostave da rastu preko noći u inkubatoru.

Nakon inkubacije preko noći, kružno područje bez bakterijskog rasta okruživat će svaki papirnati disk. Ovo područje se zove zona inhibicije. Promjer zone inhibicije za svaki disk se mjeri i uspoređuje s kontrolnom kartom kako bi se utvrdilo je li testirani soj bakterije rezistentan, srednji ili osjetljiv na svaki od različitih antibiotika. Velika zona inhibicije značila bi da je soj bakterije osjetljiv na antibiotik na testnom disku.

Metoda razrjeđivanja je antibiogram koji se koristi za određivanje najučinkovitije koncentracije antibiotika protiv soja bakterija. Započinje uzgojem ili uzgojem svježe serije testirane bakterije preko noći, a zatim provjerom čistoće novih kultura ili pročišćavanjem kulture. Također se pripremaju dvije kontrolne ili usporedne bakterije. Koncentracija bakterijskog soja određuje se spektrofotometrom, a koncentracija se podešava u raspon prikladan za metodu razrjeđivanja.

Serijsko razrjeđivanje antibiotika koji se ispituje priprema se povećanjem i postupnim promjenama koncentracije u različitim bočicama. Jedna serija različitih koncentracija antibiotika inokulira se s jednakim količinama testnog bakterijskog soja, a druge serije se inokuliraju kontrolnim bakterijskim sojevima. Sve koncentracije inokuliranih antibiotika ostavljene su da rastu preko noći u inkubatoru ili dok se u nekim bočicama ne primijeti vidljiv rast bakterija. MIC je koncentracija antibiotika kod koje se ne opaža vidljivi rast bakterija. MIC vrijednost je kontrolirani način za procjenu promjene otpornosti bakterijskih sojeva i postavlja ograničenja na antibiotsku terapiju za infekcije.