Interni standard je poznata količina kemikalije koja se dodaje analitičkom uzorku, što tehničarima omogućuje kalibraciju laboratorijskih instrumenata. To također omogućuje izračun količina nepoznatih kemikalija, jer će instrument prikazati količinu poznatog standarda kao referencu. Testovi koji mogu imati koristi od internog standarda uključuju plinsku i tekućinsku kromatografiju.
Plinskom kromatografijom ispareni uzorak prolazi kroz kolonu napunjenu čvrstim, vrlo čistim oblikom tla. Uzorak se pomiče kroz kolonu s inertnim ili nereaktivnim plinom kao što je dušik ili argon. Različite molekule apsorbiraju na stupcu, a zatim se oslobađaju na temelju njihove molekularne strukture. Plin zatim nosi odvojeni uzorak u plamen kako bi se stvorili ioni ili molekule s malim električnim nabojem. Detektor određuje količinu svakog iona i prikazuje rezultate na grafikonu.
Tekuća kromatografija također razdvaja uzorke u različite molekule, ali koristi tekuće otapalo za pomicanje uzorka gravitacijom ili pritiskom preko nepokretnog materijala. Materijal za kromatografski sloj može biti smola, dijatomejska zemlja ili čak neka druga tekućina. Uzorak se stavlja na vrh i dodaje se otapalo kako bi se uzorak potisnuo kroz materijal kolone.
Dijelovi uzorka će proći kroz kolonu različitim brzinama na temelju molekularnih ili ionskih karakteristika. Mali uzorci tekućine, nazvani alikvoti, uzimaju se u pravilnim intervalima s dna kolone. Ovi uzorci će sadržavati različite molekule koje su se odvojile u stupcu i analiziraju se kako bi se odredio njihov sastav.
U obje vrste kromatografije mnoge varijable mogu utjecati na rezultate. Brzina protoka plina nosača može se neznatno promijeniti ili stupci mogu biti na različitim temperaturama za različite uzorke. Dodavanje kalibriranog internog standarda daje poznati rezultat za svaki uzorak stavljen u ispitni instrument. Ako se neka varijabla u instrumentu, kao što je brzina protoka plina, promijeni za mali postotak, standard će se promijeniti za isti iznos.
Nakon što je instrument kalibriran provođenjem uzorka s internim standardom, nepoznati kemijski uzorak može se proći kroz isti instrument, s uključenim standardom. Rezultati će pokazati kemijski sastav nepoznatog, plus interni standard, ucrtan na grafikonu koji je napravio instrument. Poznavajući količinu internog standarda, može se odrediti relativna količina nepoznate kemikalije, što će omogućiti izračun koncentracije.
Važno je napomenuti da se interni standard ne koristi za kemijsku reakciju s bilo kojim uzorkom. Umjesto toga, koristi se za usporedbu molekula bilo kojeg nepoznatog materijala s poznatom količinom standarda. Ova tehnika je poznata kao postavljanje jedne varijable, jer će poznati standard uvijek ostati isti od uzorka do uzorka, bez obzira na druge uvjete koji se mogu promijeniti.