U biblijsko doba ljudi su govorili četiri osnovna jezika: latinski, grčki, aramejski i hebrejski. Stari zavjet Biblije izvorno je napisan na aramejskom i hebrejskom, a Novi zavjet napisan je na grčkom. Ova mješavina jezika odražava podrijetlo različitih ljudi koji su doprinijeli Bibliji, budući da se govorni i pisani jezici razlikuju po etničkoj pripadnosti, klasi i obrazovanju. Tri od četiri jezika smatraju se mrtvim jezicima, što znači da se više ne govore iako ih znanstvenici nastavljaju čitati i proučavati. Četvrti, hebrejski, još se koristi u dijelovima Bliskog istoka i u Knjigama Tore, židovske Biblije.
Aramejski je vjerojatno najmanje poznat od jezika biblijskih vremena. Ovaj se pojam zapravo odnosi na obitelj starih semitskih jezika koji su se široko govorili diljem Bliskog istoka. Aramejski je usko povezan s hebrejskim, koji je posudio pismo za svoju abecedu. Biblijski aramejski se više ne koristi, iako se moderni jezici u obitelji koriste u raštrkanim dijelovima svijeta za liturgiju, vjersku praksu i komunikaciju u nekim regijama. Taj je jezik bio zajednički jezik u Palestini i najvjerojatnije je bio jezik kojim je sam Isus govorio. Na Bliskom istoku je zamijenjen arapskim u sedmom stoljeću.
Grčki jezik kojim se govorilo u biblijska vremena bio je običan grčki, koji je povezan s modernim grčkim, iako je dovoljno različit da ga govornici novogrčkog ne mogu razumjeti. Obični grčki bio je temeljniji dijalekt od rafiniranog starogrčkog kojeg su koristili Aristotel i Platon. Iako se biblijski grčki više ne govori, neki znanstvenici još uvijek čitaju Novi zavjet na ovom jeziku. Mnogi govornici grčkog jezika i znanstvenici živjeli su u istočnim dijelovima Rimskog carstva i doprinijeli jeziku i kulturi regiji.
Latinski su govorili znanstvenici i administratori. Bio je to službeni jezik Rimskog Carstva, a papirologija, dekreti i najave bili su ponuđeni na tom jeziku. Malo je vjerojatno da je latinski bio široko rasprostranjen među običnim građanima, iako su ga možda koristili i obrazovaniji pojedinci. Latinski je usvojen za vjersku liturgiju tek u drugom stoljeću, kada je raselio grčki diljem Carstva. Roditelj je romanskih jezika, uključujući talijanski, francuski, portugalski i španjolski.
Malo je ljudi govorilo hebrejski u biblijska vremena jer ga je uglavnom zamijenio aramejski, ali većina Židova čitala je Bibliju na hebrejskom. Oživljavanje u 1800-ima vratilo je biblijski hebrejski u život, sačuvavši ga kao živi jezik, iako ga govori ograničen broj pojedinaca.
Ova četiri osnovna jezika predstavljaju različite kulture i etničke pripadnosti, a svi oni zauzimaju istaknuto mjesto u Bibliji. Biblijski znanstvenici često proučavaju dva ili više ovih jezika u pokušaju da dublje razumiju Bibliju i ljude koji žive na njezinim stranicama.