Imunohistokemijsko (IHC) protutijelo je reagens koji se obično koristi u znanstvenim studijama za označavanje antigena od interesa. Antigen je svaka mala molekula koja može izazvati imunološku reakciju koja prisiljava proizvodnju antitijela protiv tog pojedinačnog antigena. Temeljeno na imunološkom sustavu sisavaca, proizvodnja antitijela je jedan korak u procesu identificiranja materijala kao stranog kako bi tijelo moglo napasti i izbaciti invazivnu tvar, bilo da se radi o virusu, bakterijskoj infekciji ili maloj molekuli kao što je pelud.
Antitijela mogu imati ogromnu specifičnost i sposobnost vezanja u označavanju antigena. Ta se specifičnost iskorištava u korist znanstvenika kada je proizvodnja antitijela usmjerena na identifikaciju specifičnih antigena od interesa. Tanak dio tkiva može se obojati antitijelom tako da eksperimentator može lako identificirati sva antigenska mjesta prisutna u tom uzorku. Mnoge tvrtke specijalizirane su za stvaranje antitijela, zbog čega je ogroman kolektivni katalog antitijela dostupan znanstvenicima i eksperimentatorima.
IHC protutijelo se koristi u različitim eksperimentalnim tehnikama. Često se koristi bojanje antitijela u tankim dijelovima tkiva ugrađenim u parafin ili plastiku kako bi se antigeni mogli pronaći in situ. IHC antitijelo se također može koristiti u eksperimentalnim tehnikama precipitacije kao što je test ko-imunoprecipitacije, fokusirajući se na izvlačenje antigena iz otopine kako bi se kvantificirala količina antigena prisutna u velikom komadu tkiva. Testovi koji mjere količinu svjetlosti koja može dobro proći kroz ploču kulture tkiva nakon što je supernatant bio izložen dnu dobro prethodno obloženog IHC antitijela također se često koriste za kvantificiranje količine antigena u homogeniziranom uzorak tkiva.
Moguće je imati protokole bojanja antitijela koji se oslanjaju na korištenje jednog protutijela za detekciju antigena. Ovi se protokoli obično koriste na uzorcima tkiva koji su ugrađeni u nereaktivnu podlogu i postavljeni na staklo. Ovi postupci bojanja s pojedinačnim antitijelima također su popularni u laboratorijima koji označavaju vlastita antitijela molekulama za otkrivanje kao što su fluorofori.
Češće, međutim, protokoli bojanja antitijela zahtijevaju korištenje primarnih i sekundarnih antitijela. Primarno IHC protutijelo se stvara protiv specifičnog antigena, što se može rijetko proučavati. Sekundarna IHC protutijela će se podići protiv primarnog IHC protutijela. Međutim, sekundarno protutijelo bit će označeno identifikacijskom molekulom kao što je biotin ili fluorofor. Ova tehnika s dva antitijela je uobičajena jer tvrtke štede novac dodavanjem fluorofora ili skupih reagensa za označavanje velikim količinama antitijela nastalih protiv imunoloških markera određene vrste, umjesto označavanja skupih reagensa na antitijelo stvoreno protiv antigena koje bi moglo proučavati vrlo malo znanstvenici.