Kolonija Plymouth bila je poslovni pothvat između skupine engleskih obitelji i trgovaca od 1620. do 1691. godine. Ova kolonija bila je sa sjedištem u tada neistraženoj regiji Cape Cod današnjeg Massachusettsa. Unatoč relativno kratkom životnom vijeku kolonije i ranim financijskim neuspjesima, kolonija Plymouth smatra se jednim od važnih temeljnih obilježja u povijesti SAD-a. 1691. kolonija je raspuštena, kada je uključena u veću koloniju Massachusetts Baya.
Za razliku od drugih engleskih i francuskih kolonija koje su se polako pojavljivale u Novom svijetu, klijavost kolonije Plymouth započela je vjerskom slobodom, a ne financijskom dobiti. Grupa vjernika, otkrivši da su njihove biblijske metode religije okaljane etabliranom Engleskom crkvom, odvojila se od Anglikanske crkve i sastala se privatno. Poznati kao separatisti, ti su ljudi proganjani zbog svojih uvjerenja i zatvarani, kao i napadi na njihove domove. Grupa je pobjegla u Nizozemsku na neko vrijeme prije nego što je dobila dopuštenje da se naseli na američkom kontinentu.
Kako bi financirali svoju ekspediciju, Separatisti su sklopili ugovor sa grupom engleskih trgovaca, Merchant Adventurers. Opskrbljivali su Separatiste sredstvima za pomorska putovanja i zalihe u zamjenu za sirovine i robu ubranu s američkog kontinenta. Nakon niza kašnjenja, grupa je isplovila slavnim brodovima Mayflower i Speedwell u rujnu 1620.
Početak kolonije u Novom svijetu bio je klimav od samog početka. Turbulentno vrijeme izbacilo je brodove s kursa, a grupa je sletjela sjeverno od svog očekivanog odredišta, koje im je zakonski odobreno. Grupa je stigla na početku zime, nespremna za teške uvjete na sjevernom dijelu kontinenta. Te prve zime polovica kolonista je stradala. Pomoć domaćih domorodaca spasila je pridošlice od potpune katastrofe, a sljedeće godine održana je gozba zahvalnosti.
Kolonisti su svoju tvrtku nazvali Plimouth Plantation, i unatoč njihovim poteškoćama kolonija je polako rasla. Doživjeli su nekoliko zastoja, poput novih dolazaka religioznih puritanskih doseljenika, ali malo popratnih zaliha, i sve većeg manjka trgovačkih avanturista zbog sporih ili nestalih pošiljki prihoda. Nakon političke revolucije u Engleskoj, povelja kolonije Plymouth nije obnovljena i uklopljena je u veću kraljevsku koloniju.
Unatoč financijskim neuspjesima i ranom raspuštanju kolonije, Plymouth Colony blista kao primjer samodostatne vlade i vjerskih sloboda koje su kasnije definirale neovisne Sjedinjene Države. Kada su brodovi grupe zalutali s kursa 1620. godine, separatisti su stvorili svoj vlastiti savez, Mayflower Compact. Ovaj je savez uspostavio prvi pisani zapis u moderno doba vladavine uz pristanak naroda. Utemeljena na vjerskoj slobodi, Plymouth Colony utrla je put drugim vjerskim skupinama koje traže utočište u Novom svijetu. Turisti mogu posjetiti izvornu lokaciju kolonije u Massachusettsu, promatrajući kamen, Plymouth Rock, na koji su separatisti navodno sišli s Mayflowera.