Pirogeno testiranje definira proces koji koriste proizvođači lijekova kako bi utvrdili jesu li bakterijski toksini prisutni u cjepivima i lijekovima koji mogu uzrokovati groznicu kada se koriste na ljudima. Određuje jesu li mikrobi ili njihovi metaboliti prisutni u intravenskim otopinama tijekom proizvodnog procesa. Najčešći i najstariji oblik pirogenog testiranja sastoji se od ubrizgavanja droga zečevima kako bi se utvrdilo razvija li se groznica. Noviji test koristi krv iz rakova potkovica za testiranje toksina.
Metoda ispitivanja pirogena na zečevima pojavila se 1940-ih nakon što su se neki pacijenti razboljeli od intravenskih lijekova. Hipodermijski uređaji u to su se vrijeme pokazali korisnima za davanje lijekova izravno u krvotok za pacijente koji nisu mogli tolerirati oralne lijekove. Iako su potkožni uređaji bili sterilni, lijekovi nisu uvijek bili sigurni.
Pacijenti su ponekad razvili visoku temperaturu, zimicu i bolove u tijelu, a neki ljudi su pretrpjeli šok. Liječnici nisu znali zašto se to dogodilo, često su to stanje nazivali groznicom od injekcije, fiziološkom groznicom ili groznicom destilirane vode. Istraživači su kasnije otkrili da su neki lijekovi i cjepiva u proizvodnim laboratorijima kontaminirani pirogenim endotoksinima, snažnim bakterijama koje podnose sterilizaciju.
Ljudsko tijelo se bori protiv izloženosti bakterijskim toksinima u okolišu kroz kožu. Kada se kontaminirani lijekovi ubrizgavaju u krvotok, toksini zaobilaze normalne obrambene mehanizme. Bijele krvne stanice počinju otpuštati drugi oblik pirogena koji uzrokuje visoku temperaturu, što može dovesti do šoka i smrti.
Ispitivanje pirogena u laboratorijima za lijekove uključuje opremu za grijanje koja se koristi za osiguranje sterilizacije. Lijek se ubrizgava u ušne vene kunića kako bi se vidjelo hoće li se razviti groznica. Rektalne temperature pokusnih životinja analiziraju se nakon 30 minuta i ponovno jedan do tri sata kasnije. Ako životinje ostanu bez groznice, otopina je slobodna od toksina.
Proces ispitivanja pirogena na životinjama obično uključuje ubrizgavanje nekoliko zečeva odjednom unutar vremenskog okvira od 10 minuta. Doziranje za svakog kunića ovisi o tjelesnoj težini, dobi i spolu. Ista skupina zečeva može se više puta testirati svakih nekoliko dana dok ne razviju toleranciju na lijekove.
Novija tehnika testiranja pirogena naziva se test limulus amebocitnog lizata (LAL). Krv rakova potkovaca sadrži visoke razine toksina koji se prirodno nalaze u morskom životu. Znanstvenici su otkrili način korištenja krvi za testiranje bakterijskog toksina u lijekovima i sirovinama koje se koriste za proizvodnju lijekova. Postupak testiranja LAL pirogena mogao bi biti 100 puta osjetljiviji od metoda ispitivanja na zečevima. Medicinski uređaji koji se ugrađuju u ljude prolaze kroz LAL testiranje, uz radioaktivne lijekove i anesteziju.