Od svih likova u obitelji Disney, nijedan lik nije poznatiji od Mickeyja Mousea. Mickey Mouse se prvi put pojavio u kratkom animiranom filmu Steamboat Willie. Film je premijerno prikazan u kazalištu Colony u New Yorku 18. studenog 1928. godine.
Steamboat Willie bio je prvi crtić sa sinkroniziranim zvukom. U ovom početnom crtiću o Mickeyju, mali miš igra ulogu palube riječnog broda. Koristi životinje za sviranje pjesme Turska u slami. Minnie Mouse njegova je oduševljena publika dok to radi. Nažalost, kapetan riječnog broda po imenu kapetan Pete kažnjava nestašnog Mickeya tako što ga šalje da guli krumpire u brodskoj kuhinji.
Ovaj prvi crtani film otvorio je put Mickeyu da postane ono što je danas — kulturna ikona. Od tog debija, Mickey se pojavio u stotinama crtića. U 1950-ima čak je glumio u Klubu Mickey Mousea, popularnom televizijskom programu za djecu. Danas je Mickeyjeva slika zalijepljena na majice, satove, kutije za ručak i bilo koju drugu robu koja se nalazi u trgovinama.
Tvorac Mickeyja bio je Walt Disney. Walt je rođen 5. prosinca 1901. u Chicagu, IL od oca irsko-kanadskog i majke njemačkog porijekla. Bio je jedno od petero djece, a mladi Disney je od malih nogu pokazivao zanimanje za crtanje. Veći dio djetinjstva proveo je u Marcelineu, Missouri. Sa sedam godina često je crtao slike i prodavao ih svojim susjedima. Ova rana sklonost skiciranju dovela ga je do karijere u animiranju.
Lik Mickey Mouse rođen je kada je Disney izgubio prava na svoj lik Oswald the Lucky Rabbit. Udružio se s Ub Iwerksom kako bi dizajnirao lik miša. Originalne skice za Mickeyja pokazale su mu krugove za glavu, tijelo i uši.
Godine 1939. film pod nazivom The Pointers otkrio je lik s tijelom više oblika kruške. Na očima su mu bile nacrtane zjenice kako bi mogao biti izražajniji. Animatori iz 1940-ih željeli su njegovim ušima dati trodimenzionalni izgled; međutim, današnji Mickey više liči na Mickeyja iz ranih dana.
Walt Disney je bio prva osoba koja je svom liku miša dala glas, ali je kasnije taj posao dao čovjeku po imenu Jim MacDonald. Lik s osebujnim, škripavim glasom brzo je postao miljenik publike. Nakon MacDonalda, Disneyevo carstvo imalo bi druge glumce da preuzmu glasovni rad.
Proliferacija Mickeya nastavila je rasti. Neumitni miš glumio je u svom stripu koji je počeo 13. siječnja 1930. Godine 1932. Walt Disney je osvojio Oscara za svoju kreaciju Mickeyja Mousea.
Godine 1933. Ingersoll je proizveo prvi Mickey Mouse sat. Koštao je 3.25 USD (USD), ali je kasnije snižen na 2.95 USD. Danas ga milijuni ljubitelja Mickeyja Mousea mogu osobno vidjeti ako posjete Disneyjev tematski park. Zapravo, Mickey nosi titulu glavnog pozdravnika u iznimno popularnim odmaralištima tematskih parkova. Fascinacija Mickeyjem traje od njegova predstavljanja 1928. Djeca i odrasli diljem svijeta povezuju magiju i uzbuđenje s likom Mickeyja Mousea.