Bojenje antitijela je laboratorijski postupak koji se koristi za bojenje uzorka kako bi se otkrila prisutnost određenih antigena u uzorku ili za isticanje antigena kako bi se mogli jasno vidjeti. Postoji niz različitih postupaka bojenja antitijela koji se mogu koristiti, ovisno o uzorku i preferencijama tehničara. Ova tehnika se poučava na fakultetskoj i sveučilišnoj razini u mnogim regijama, a u srednjim školama s naprednim znanstvenim programima učenici također mogu naučiti bojanje antitijela.
Kod bojenja antitijela, antitijelo se unosi u uzorak kao što je struganje ili biopsija. Ako u uzorku postoje antigeni na koje će protutijelo reagirati, ono se za njih zaključava. Kada se uzorak ispere, višak antitijela će se isprati, ostavljajući iza sebe antitijela koja su se pričvrstila za uzorak. Ako istraživač koristi konjugirana antitijela s pričvršćenim fluorescentnim oznakama, uzorak će zasvijetliti pod odgovarajućim osvjetljenjem, odajući prisutnost dotičnih antitijela.
U drugim slučajevima ljudi moraju koristiti sekundarna antitijela. Nakon ispiranja uzorka dodaju sekundarno protutijelo, pripravak s pričvršćenom fluorescentnom oznakom. Sekundarna antitijela veže se na primarna antitijela u uzorku i fluoresciraju pod svjetlom kao što je gore objašnjeno. Fluorescencija se može koristiti u dijagnozi bolesti, pri čemu laboratorijski tehničari provjeravaju uzorke na antigene povezane s određenim bolestima, a može se koristiti i za traženje znakova kontaminacije i utvrđivanje prisutnosti antigena iz drugih razloga.
U mikroskopiji, bojenje antitijelima ponekad može biti od pomoći za isticanje određenih struktura. Čak i uz izvrsnu razlučivost, mikroskopija ponekad može biti teška za pregled, a može biti izazovno odabrati skrivene ili male strukture na slici. Korištenje bojenja antitijelima omogućuje ljudima da kreiraju zastavu za lako prepoznavanje i ocrtavanje zanimljivih struktura, kao što su određene vrste tkiva ili strukture unutar stanica. Fluorescencija će se vidjeti na svim mjestima na stakalcu gdje je prisutno protutijelo od interesa, mapirajući strukture u uzorku.
Bojenje antitijela zahtijeva pristup laboratorijskoj opremi, antitijelima i raznim otopinama koje se koriste tijekom procesa fiksiranja i čuvanja uzoraka. Važno je pravilno izvesti postupak kako bi se izbjegla kontaminacija i pogreške poput dopuštanja otopinama da predugo stoje na uzorku, prikrivajući ili zbunjujući rezultate. Mnogi laboratoriji imaju priručnik koji slijedi njihovo osoblje, a prilikom pripreme materijala za istraživanje, ljudi će detaljno opisati svoje metode kako bi se njihov rad mogao replicirati.