Fosforilacija proteina je dodavanje fosfatne skupine (PO4) specifičnom proteinu, obično na ostatku serina, treonina ili tirozina. Općenito, fosforilacija proteina jedan je od glavnih načina na koji se u stanicama reguliraju transdukcija signala i enzimske aktivnosti. Antitijela koja otkrivaju ta fosforilirana proteinska mjesta nazivaju se fosfo antitijela. Sposobnost detekcije fosforiliranog ostatka proteina na određenom mjestu vrijedan je alat za otkrivanje aktivnosti staničnih signalnih putova i ključ je za razumijevanje mnogih procesa stanične signalizacije.
Dodavanje fosfatne skupine ostatku serina, treonina ili tirozina može rezultirati aktivacijom ili inaktivacijom proteina bilo induciranjem konformacijske promjene u proteinu, ili utjecajem na interakcije proteina s drugim proteinima ili molekulama. Fosforilacija igra značajnu ulogu u mnogim važnim staničnim signalnim procesima, uključujući rast i smrt stanica, putove koji induciraju ili inhibiraju tumorigenezu, hormonske signalne procese i proizvodnju energije. Proteini se fosforiliraju enzimima zvanim kinaze, a defosforiliraju enzimima zvanim fosfataze. Proces reverzibilne fosforilacije stoga omogućuje stanici da vrši strogu kontrolu nad ovim važnim signalnim putovima.
Antitijela su molekule u obliku slova Y koje sadrže mjesta za vezanje antigena na kraju svakog Y kraka. Općenito, antitijela prepoznaju jedinstvene sekvence u svojim odgovarajućim antigenima, koji se nazivaju epitopi. Proizvodnja antitijela događa se prirodno kao dio imunološkog odgovora kada je domaćin izložen stranom tijelu, dopuštajući protutijelom da specifično prepozna i neutralizira te strane antigene. Ovaj prirodni proces može se koristiti u istraživačke svrhe generiranjem antitijela koja će specifično otkriti antigen ili protein od interesa. Kada stvaraju istraživačka antitijela, vrste domaćini su često zečevi, miševi, ovce ili koze, ali istraživači također mogu koristiti imunološke stanice u kulturi za stvaranje antitijela protiv antigena od interesa.
Fosfo protutijela mogu se koristiti u istraživačkim ili kliničkim primjenama. U kliničkim uvjetima, detekcija određenog fosforiliranog proteina pomoću fosfo protutijela u uzorku tumora može pomoći u procjeni stupnja tumora, ili čak pomoći u predviđanju ishoda bolesti. U istraživačkim postavkama, fosfo antitijela se često koriste za proučavanje aktivacije signalnih puteva stanica kao odgovor na specifični podražaj.
Mnoge tvrtke za proizvodnju antitijela dostupne su za opskrbu fosfo protutijelima istraživačima i kliničarima. Istraživači mogu odabrati ta antitijela iz kataloga antitijela, koji često sadrži reagense za stotine različitih fosforiliranih proteina. Osim toga, nekoliko dobavljača antitijela nudi proizvodnju prilagođenih protutijela za rijetko proučavane fosforilirane proteine za koje komercijalno fosfo protutijelo nije dostupno.